Исследователи из Института Гладстона и Калифорнийского университета в Сан-Франциско разработали новую технологию редактирования генов с помощью CRISPR-Cas9. Предложенный метод не использует вирусы и позволяет вводить длинные цепочки ДНК с высокой точностью.
Система редактирования генов CRISPR-Cas9 показала свою эффективность во многих исследованиях. Она позволяет отключать, удалять или заменять отдельные участки генов. Технология традиционно использовала для переноса нужной ДНК (матрицы) вирусные векторы — оболочки вирусов без их болезнетворных компонентов. Ключевой недостаток технологии в том, что ученым сложно контролировать куда именно будет встроен нужный материал, что приводило к множественным побочным мутациям.
В своей работе ученые используют одноцепочечную ДНК и тот же белок Cas9, который действует как ножницы, разрезая молекулу в нужных местах. Еще в 2015 году авторы работы впервые продемонстрировали возможность вставлять короткие матрицы ДНК в иммунные клетки без вирусных векторов, используя электрическое поле. Новая работа объединила эту технологию с использованием белка Cas9.
Исследование показало, что новый метод генного редактирования упрощает реинжиниринг большого количества клеток для терапевтических целей. При этом эффективность достигает 80–90%. В результате ученые смогли быстро и эффективно создать достаточное количество CAR-T-клеток (генномодифицированных Т-клеток).
Созданные клетки можно использовать для борьбы с множественной миеломой, раком крови, а также для перезаписи последовательности генов, мутации которых могут привести к редким наследственным иммунным заболеваниям.
