Исследователи из Швейцарской высшей технической школы Цюриха ETH Zurich использовали технику 4i для создания нового клеточного атласа сетчатки глаза человека. В течение 18 дней робот сделал снимки 18 различных партий окрашенных белков. В конечном итоге, ученые получили красочное микроскопическое изображение, на котором видно 53 различных типа белков.
При флуоресцентной микроскопии ткани визуализируются с использованием флуоресцентных красителей для определенных белков. Но эту технику можно использовать только с тремя-пятью разными красителями одновременно, что ограничивает детализацию, которую можно запечатлеть на одном изображении.
Чтобы расширить детали в 10 раз, авторы исследования воспользовались новой техникой — итеративной непрямой иммунофлуоресцентной визуализацией (англ. iterative indirect immunofluorescence imaging, 4i). Основной принцип достаточно простой: после того, как ученые сделали снимок и провели измерения с использованием трех красителей, надо вымыть красители из образца, а затем окрашивать его еще тремя. Они повторяли это снова и снова. Затем ученые использовали компьютер, чтобы объединить все снимки в один. В итоге, получилось одно микроскопическое изображение с маркировкой десятков типов белков.
Полное изображение сетчатки 4i, показывающее сложные детали ткани.
Фото: Вале и др., Nature Biotechnology
Исследование опубликовано в журнале Nature Biotechnology.
Фото в полном разрешении доступно по ссылке.
